為食品加工工藝和防腐的需要，以及為了改善食品品質(zhì)和色、味、香，在食品生產(chǎn)加工過程中，食品中通常會加入少量的天然或者化學合成的物質(zhì)。近幾年，由于食品安全問題層出不窮，人們越來越重視食品添加劑所帶來的安全隱患。
　　杭州賽析科技參考國標（GB/T 23495-2009），利用全新高性能的501高效液相色譜儀，經(jīng)實踐檢測可提供苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的HPLC檢測方案，得出的結果準確可靠，檢出限好，適用于食品中苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的測定，僅供廣大用戶參考。
　　以下是苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的詳細檢測方法。

      1　儀器與試劑
1.1  儀器
　　STI501高效液相色譜儀，UV501紫外檢測器，手動進樣閥(7725i)，N2000色譜工作站
　　Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；
　　超聲波水浴振蕩器；
　　食品粉碎機；
　　pH計；
　　天平：分度值為0.001 mg。
1.2  試劑
　　甲醇：色譜純。
　　乙酸銨溶液：稱取1.54 g乙酸銨，加水溶解并稀釋至1000 mL，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾。
　　亞鐵氰化鉀溶液：稱取106 g亞鐵氰化鉀[K3Fe(CN)6?3H2O]加水至1000 mL。
　　乙酸鋅溶液：稱取220g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2?2H20]溶于少量水中，加入30mL冰乙酸，加水稀釋至l000mL。
　　氨水(1+1)：氨水與水等體積混合。
2　色譜條件
　　色譜柱：Vertex C18柱，250mm x 4.6 mm，5μm；
　　流動相：甲醇+0.02mol/l乙酸銨溶液(5:95)；
　　流速：1 mL／min；
　　進樣量：20μL；
　　檢測波長230nm。

注：1-安賽蜜；2-苯甲酸；3-山梨酸；4-糖精鈉；混合標準溶液色譜圖 

3　試樣溶液的制備
3.1  含脂肪、蛋白的樣品
　　稱取約10g左右樣品于燒杯中（固體樣品要用攪拌機攪碎），加入約60ml蒸餾水，再超聲波水浴振蕩10分鐘，然后用轉移到100ml比色管中，并用少量水潤洗干凈燒杯；
　　加入5ml亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入5 mL乙酸鋅溶液，搖勻；
　　根據(jù)PH計讀數(shù)，用氨水調(diào)節(jié)PH至接近中性；
　　用水定容至100ml刻度，搖勻，用三角瓶,濾紙，玻璃棒，漏斗過濾；
　　吸取濾液約1.5ml，用微孔濾膜過濾，濾液待上機分析。
3.2  不含脂肪、蛋白的樣品
　　稱取約10g左右樣品于燒杯中（固體樣品要用攪拌機攪碎），加入約60ml蒸餾水，再超聲波水浴振蕩10分鐘，然后轉移到100ml比色管中，并用少量水潤洗干凈燒杯；
　　根據(jù)PH計讀數(shù)，用氨水調(diào)節(jié)PH至接近中性；
　　用水定容至100ml刻度，搖勻，用三角瓶,濾紙，玻璃棒，漏斗過濾；
　　吸取濾液約1.5ml，用微孔濾膜過濾，濾液待上機分析。
 
注：1-安賽蜜；2-苯甲酸；3-山梨酸；4-糖精鈉；
混合標準溶液色譜圖
4　結果分析
4.1  儀器精密度的測定
　　取濃度為苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度為10.0ug/ml，平行測定7次。
表1：精密度的測定結果

　　從上表可以看出清涼茶的加標測定的回收率：苯甲酸為98.5%-103.4%，山梨酸為98.3%-103.1%，糖精鈉為97.5%-104.3%,安賽蜜為98.4%-103.3%。各組分的回收率都接近100%，滿足日常檢測的要求。

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