乳品塑化劑快速檢測試劑盒（貨號：Ounuo95002）

一、原理

乳品塑化劑快速檢測試劑盒本試劑盒采用間接競爭 ELISA 方法，在微孔條 上預(yù)包被鄰苯二甲酸二正丁酯抗原，樣本中的殘留 物鄰苯二甲酸二正丁酯將和酶標(biāo)板包被的抗原競爭 鄰苯二甲酸二正丁酯抗體，用 TMB 底物顯色，樣 本吸光值與其所含殘留物鄰苯二甲酸二正丁酯的含 量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物 鄰苯二甲酸二正丁酯的含量。

二、試劑盒特性

1. 試劑盒靈敏度： 30ppb

2. 孵育溫度： 25℃ 

3. 孵育時間： 15min～15min

4. 樣本檢測下限

液態(tài)奶················································ 30ppb

牛、羊乳粉···········································210ppb

5. 交叉反應(yīng)率 鄰苯二甲酸二正丁酯

6. 樣本回收率

液態(tài)奶·········································· 90% ±30%

牛、羊乳粉······································ 90% ±30%

三、所用儀器、試劑

具備的儀器：酶標(biāo)儀、均質(zhì)器、振蕩器、天平（感 量 0.01g）。

微量移液器：單道 20μl～200μl、單道 100μl～ 1000μl、多道 30～300 μl。

試 劑：純化水。

四、樣本前處理步驟（乳品塑化劑快速檢測試劑盒）

（a）液態(tài)奶 1、 取 100ul 均質(zhì)后的樣本，加入 400ul 樣本稀釋 液，充分震蕩； 2、 取下層液體用于分析。 樣本稀釋倍數(shù): 1 倍 （b）牛、羊乳粉 1、 取 1g 均質(zhì)后的樣本，加入 6ml 純化水，充分 震蕩； 2、 取 100ul 稀釋后的樣本，加入 400ul 樣本稀釋 液，充分震蕩；

五、操作步驟（乳品塑化劑快速檢測試劑盒）：

 1、 從 2～8℃冷藏環(huán)境中取出所需試劑，室溫（20～ 25℃）平衡 30min 以上，注意每種液體試劑使 用前均需搖勻。 

2、 取出框架及需要數(shù)量的微孔，將不用的微孔放 入自封袋，保存于 2-8℃。 

3、 編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每 個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做 2 孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和 樣本孔所在的位置。 

4、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本 50μl/孔到各自的微孔中，然后加 入酶標(biāo)記物 50μl/孔，再加入抗體工作液 50μl/ 孔，用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻。25℃環(huán)境 中反應(yīng) 15min。 

5、 將孔內(nèi)液體甩干，用已稀釋的洗滌液 250μl/孔 洗板 4～5 次，每次間隔 15～30 秒，用吸水紙 拍干（拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺 破）。 

6、 顯色：加入底物 A 液 50μl/孔，再加入底物 B 液 50μl/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜封板，25℃ 環(huán)境中避光顯色 15min。 7、 測定：加入終止液 50μl/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè) 定酶標(biāo)儀于 450nm 處（建議用雙波長 450/630n m 檢測，5min 內(nèi)讀數(shù)），測定每孔 OD 值。